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紫外分光光度法测定刺梨原汁中总黄酮含量的研究

2020-11-27 14:50:36 来源: 金博宝188官网注册 导刊

　　紫外分光光度法测定刺梨原汁中总黄酮含量的研究
　　摘要：建立一种操作简单、结果可靠、测定成本较低的检测刺梨原汁中总黄酮含量的方法。通过实验验证，方法定量限为7.00mg/100g，在常见样品浓度和检出最高限的测试结果变异系数（CV值）分别为2.3%、1.9%，4个刺梨原汁样品中总黄酮含量分别为80.24、72.34、86.69、74.39mg/g，平均回收率为100.3%。
　　关键词：刺梨原汁；总黄酮；含量测定
　　刺梨是贵州的特色食品资源[1]，含有丰富的活性成分黄酮类物质，贵州省生产的刺梨鲜果，加工产品主要以刺梨原汁为主，然后再利用刺梨原汁加工成浓缩汁、饮料等多种营养食品和保健品[2]，刺梨原汁中含有丰富的活性成分总黄酮，是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生，改善心脑血管疾病的症状[3] [4]。建立一种适合刺梨原汁中总黄酮含量的测定方法，为检测机构和相关企业提供更适合的检测方法，提高检测效率，也对于规范刺梨产品加工企业质量管理、强化市场监管、促进贵州刺梨产业的健康发展具有重要意义和作用。
　　一、仪器、试剂及材料
　　1.仪器
　　TU-1901紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司。
　　2.对照品
　　芦丁对照品（供UV法测定，含量为92.4%），中国食品药品检定研究院。
　　3.试剂
　　无水乙醇、甲醇，均为分析纯。
　　4.样品
　　“刺梨原汁”（贵州天泷集团投资开发有限公司，样品1）；“刺梨原汁”（贵州贵定敏子食品有限公司，样品2）；“刺梨原汁”（贵州山果王健康实业有限公司，样品3）；“刺梨汁”（贵州绿视野绿色开发有限公司，样品4）。
　　二、方法与结果
　　1.试样制备
　　称取1g（精确至0.01g）的试样至25ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀后，超声提取20min，室温静置30min，取上清液1mL于25mL比色管中，用甲醇定容后待测。
　　2.标准曲线的制备
　　以芦丁为对照品，精确称取芦丁标准品109.7mg（含量为92.4%）于100mL容量瓶内，用甲醇定容至刻度，得1.014mg/mL芦丁储备溶液。依次稀释至浓度为1.01μg/mL、2.03μg/mL、3.04μg/mL、4.06μg/mL、5.07μg/mL、6.08μg/mL芦丁对照品溶液，以甲醇溶液为零点，于360nm处测量吸光度。以芦丁对照品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制校准曲线，线性方程为y=0.0299x-0.0003，R2=0.9999，表明芦丁含量在0~6.08μg/mL范围内具有良好的线性关系，经计算，该方法在0~380mg/100g范围内，样品中总黄酮浓度与吸光度呈良好的线性关系。
　　3. 检出限（LOD）和定量限（LOQ）实验
　　样品空白独立测试20次实验，计算结果为0.63 mg/100g，计算标准偏差（s）为2.278×10-16。
　　根据LOD=样品空白平均值+3s，即LOD=0.63+3×2.278×10-16，计算结果保留小数点后两位，LOD=0.63 mg/100g。
　　为增加数据可信度，且检测样品的结果范围为55~90 mg/100g，取LOQ值=10×LOD值，即LOQ=6.30 mg/100g，最终取值LOQ=7.00mg/100g。
　　4.精密度实验
　　精确称取1号样品12份，其中6份分别加入3mg芦丁对照品，按照“1.试样制备”方法处理并测定，结果如表1所示。结果显示本方法在常见样品浓度和检出最高限的测试结果变异系数（CV值）分别为2.3%、1.9%，均符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制规范 食品理化检测》中相关规定，表明方法精密度良好。
　　5. 样品检测及回收率实验
　　分别取样品1、2、3、4号样品做加标回收试验，然后按照“1.试样制备”处理，结果如表2所示，样品1、2、3、4中总黄酮含量分别为80.24、72.34、86.69、74.39mg/mL，且平均回收率为100.3%，表明方法准确性好。
　　三、结语
　　综上所述，本文以芦丁为对照品，通过紫外分光光度法测定总黄酮含量，操作简单、结果可靠、测定成本较低，在总黄酮含量为7~380mg/100g范围内，精密度良好，测试结果准确,适用于刺梨原汁中总黄酮的测定。测试样品1、2、3、4中总黄酮含量分别为80.24、72.34、86.69、74.39mg/100g，而相关报道中提到刺梨鲜果中总黄酮含量高达0.89%[4],说明在加工过程中，刺梨鲜果中的大部分黄酮类化合物残留在刺梨果渣内，如何将总黄酮类化合物更有效地提取到刺梨原汁中，本方法可以为下一步研究奠定基础。
　　参考文献：
　　[1] 贵州省刺梨发展现状分析[J]. 刘易伟,杨舒清.金博宝188官网注册导刊(下旬刊),2020,(第2期)
　　[2].黔南州刺梨产业链分析[J]. 罗桃,王玉奇,陈文本. 中国林副特产，2020,(第5期)：106-107
　　[3] 刺梨中活性物质的提取与性能探讨[J].陈代秀,夏伟丽,胡思前,郭艳华,张玉敏. 化肥设计,2020,58(02):13-17
　　[4] 刺梨黄酮的精制及其抗氧化活性比较[J].张汇慧,吴彩娥,范龚健,等. 南京林业大学学报(自然科学版),2015，39 (3)：101-105
　　[5] 刺梨总黄酮的含量测定及资源利用[J].杜薇,刘国文. 食品科学,2003(01):112-114.
　　作者简介：耿宁 ，贵州省黔南州都匀人，金博宝188官网注册检测员，工程硕士。
　　耿宁，刘易伟，卿云光
　　黔南州检验检测院
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