一起金黄色葡萄球菌食物中毒的病原学分析

2021-08-17 22:04:22来源：

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　　一起金黄色葡萄球菌食物中毒的病原学分析

　　唐燕

　　（苏州工业园区疾病防治中心，江苏苏州215021）

　　摘要：目的：对食物中毒中所产生的致病菌进行检测。方法：根据国家标准，使用增菌培养基、选择性培养基、显色培养基和细菌生化鉴定系统分离和鉴定致病菌。结果：3份样均检出金黄色葡萄球菌，其中符合鉴定结果的概率为99%。结论：引起食物中毒的致病菌为金黄色葡萄球菌。

　　关键词：食物中毒；Baird-Parker琼脂平板；金黄色葡萄球菌

　　金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）属于革兰氏阳性菌，是常见的食源性致病菌，在自然界中广泛分布，通过空气及接触等传播，可对食品造成污染叫在条件适宜的情况下，会产生肠毒素，导致多种毒性蛋白的产生，诱发食物中毒及金黄色葡萄球菌类毒血症病症。金黄色葡萄球菌多存在于环境中以及人与动物的皮肤粘膜上，正常人的带菌率为 30%〜50%,人手上有14%〜44%的带菌率。实验室研究中，开展食物中毒样本的病原菌检验已成为公共卫生问题的重要内容。本实验釆用Baird-Parker琼脂平板和VITEK2全自动细菌生化鉴定仪相结合，开展病原菌病原学检验，可作为传染源控制及致病菌控制的依据

　　1材料与方法

　　1.1材料

　　1.1.1培养基与试剂

　　亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）,缓冲蛋白踪水（BPW）, 7.5%NaCl肉汤，志贺氏菌增菌肉汤，科玛嘉沙门氏菌显色培养基、Baird-Parker琼脂平板、脑心浸出液肉汤、冻干血浆、 XLD培养基、血琼脂平板、HE琼脂，北京路桥技术有限公司； GP革兰氏阳性细菌鉴定卡，购自美国bioMerieux. Ine；以上所用试剂均在有效期内㈣。

　　1.1.2检验仪器

　　恒温隔水式培养箱（型号为HP-9270）；全自动细菌生化鉴定仪器（型号为VITEK2）；生物安全柜（型号为 HFsafe-1200）«

　　1.2菌株分离与鉴定

　　沙门氏菌、志贺氏菌及金黄色葡萄球菌的检测主要根据《金博宝188官网注册国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》（GB 4789.4—2016）、《金博宝188官网注册国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》（GB 4789.10—2016）及《金博宝188官网注册国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验》（GB 4789.5— 2012）,应用VITEK2全自动细菌生化鉴定仪开展细菌生化鉴定。

　　2结果与分析

　　2.1流行病学调查

　　迷客夏圆融二店是一家饮品店，2020年3月17日某家单位的10名员工在食用了迷客夏的饮品后相继出现呕吐、腹泻等症状。首发病例于3月17日13： 40首次出现恶心、呕吐（3次）、腹痛、腹泻（3次）。该病例于17日14： 40到九龙医院就诊。余9名病例的主要临床表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻和发热等。经抗菌素和输液治疗，现已转归良好。在中心接报完成后，开展现场调研，并进行釆样干预，釆集 3种口味的朵朵云样品送检。

　　2.2分离与增菌培养

　　3份样品称量后，分别添加至缓冲蛋白豚水（BPW） [3], 7.5%NaC 1及志贺菌增菌肉汤中，均质，于36。（3培养18h；将完成增菌后的上述样品，分别接种到科玛嘉沙门氏菌显色平板、Baird-Parker琼脂平板、血琼脂平板、HE琼脂平板和XLD琼脂平板，于36 °C培养24 h。结果显示，血琼脂平板上可见金黄色、圆形、不透明的可疑金黄色葡萄球菌菌落，Baird-Parker琼脂平板上可见圆形、光滑、凸起、湿润、直径为2 mm的可疑金黄色葡萄球菌菌落。在初分离培养中, 由于样品中存在较少的菌量，会导致遗漏问题的产生，因此需要应用增菌培养物开展再分离培养。在血琼脂平板上，3 份样品均呈现金黄色，形状为圆形，不透明，表明光滑，周围部位存在溶血圈的可疑菌落生长。在Baird-Parker琼脂平板上有圆形，光滑度较高，湿润度较高，凸起，直径为2 mm, 颜色为灰色，边缘为淡色，周围存在浑浊带，外层部位存在透明带的可疑菌落生长。其余平板均无可疑菌落生长。

　　2.3纯培养

　　在Bahd-Paiker琼脂平板上挑取单个菌落分纯在血琼脂平板上，并挑^血琼脂平板的可疑单菌落，置36。。培养24h。 2.4初步鉴定

　　涂片镜检：3份样品的镜检结果均为革兰氏阳性球菌，以葡萄球形状排列，无芽抱，无荚膜。

　　2.5血浆凝固酶试验鉴别

　　在血琼脂平板上挑选单个菌落，转接至5 mL脑心浸出液培养基试管中，于36。（3培养24h。吸取0.5 mL无菌生理盐水到冻干血浆西林瓶中，摇匀，再加入脑心浸出液培养物0.3mL,混合均匀后于36。（3培养，每隔0.5 h观察1次， lh后出现凝固现象，则为血浆凝固酶阳性。在血琼脂平板上进行纯培养物的挑选，用0.45%氯化钠液制备成0.68麦氏浓度的菌悬液，接种GP革兰氏阳性细菌鉴定卡，生化鉴定应用VITEK2全自动细菌生化鉴定仪，鉴定结果为金黄色葡萄球菌，在3份样品中，金黄色葡萄球菌均存在一致性的生化结果。

　　3结语

　　金黄色葡萄球菌肠毒素可耐受100 °C煮沸30 min而不被破坏，并能抵抗胃肠道中蛋白酶的水解作用。若人们食用了金黄色葡萄球菌所污染的食物，可引起腹泻及呕吐等问题，诱发急性胃肠炎四。据郑艳敏等报道，2014—2018年苏州市217次食源性疾病暴发事件中，7.37%为金黄色葡萄球菌诱发可导致以呕吐和腹泻为主的急性胃肠炎症状闵。本次食物中毒事件中极有可能存在食品间交叉污染的情况，应当予以重视，并对本地区的食品生产经营者加以引导。

　　参考文献

　　[1]刘保光，谢苗，董颖，等.金黄色葡萄球菌研究现状[J]. 动物医学进展 ^021,42(4):128-130.

　　[2]马敏.一起金黄色葡萄球菌肠毒素食物中毒调查分析 [J],河南预防医学杂志,2020,31(12):931-933.

　　[3]郑艳敏，滕臣刚，张梦寒，等.2014—2018年苏州市食源性疾病暴发事件流行特征分析[J],现代预防医学,2020,47(2):215-218.

　　[4]郑剑，周伟艳，胡丹标，等.一起金黄色葡萄球菌食物中毒检测与分析[J],中国卫生检验杂志,2016,26(23):3464-3466.

　　[5]仇广翠，孙明忠，金浩.220株金黄色葡萄球菌的临床分布特点及耐药性分析[J],中国实验诊断学^016^0(2):269-271.