溶液的制备 对照品储备液：精确称取1.98mg芦荟大黄素与2.02mg大黄酸对照品，分别置于2mL量瓶中，向其中加入甲醇定容至刻度，摇匀即对照品储备液。对照品工作液：量取0.2mL芦荟大黄素对照品储备液，0.5mL大黄酸对照品储备液，将其置于10mL量瓶中，充分混合。供试品溶液制备：精确称取0.5g大黄粉末，将其放置于25mL量瓶中，向其中加入24mL甲醇，经30min超声提取，加入甲醇定刻度，摇匀，滤膜滤过，待测。线性关系考察：分别取1μL，5μL，10μL，15μL，20μL，25μL对照品溶液进样处理，峰面积积分。结果显示，芦荟大黄素回归方程为：Y=2.75×106X-3.53×104，r=0.9999，线性范围为0.0198-0.495;大黄酸回归方程为：Y=4.34×106X-1.31×105，r=0.9999，线性范围为0.0505-1.2625。精密度试验：精密量取10μL供试品溶液连续进行6次进样，对芦荟大黄素与大黄酸峰面积积分值进行计算，RSD分别为3.32%、0.66%，即表明仪器具有良好的精密度。稳定性试验：精密量取10μL供试品溶液，分别在制备后的0h，3h，6h，9h，12h，24h对其进行测定，并计算芦荟大黄素与大黄酸峰面积积分值，RSD分别为3.61%、1.48%，即表明在24h内供试品溶液稳定性良好。重复性试验：精密称取0.5g大黄粉末，根据“供试品溶液制备”方法完成6份溶液的制备，并进样分析，计算芦荟大黄素与大黄酸质量分数，RSD分别为4.05%、3.81%，即表明该方法具有良好地重复性。

　　回收率试验：精密称取6份0.1g大黄粉末，将其放置于10mL量瓶中，分别向其中精密添加相应体积的芦荟大黄素与大黄酸对照品储备液，向其中加入甲醇，使其能够定容至9.5mL，根据“供试品溶液制备”方法制备20mL供试品溶液，测定加样回收率以及RSD。结果显示，芦荟大黄素平均回收率为96.08%，RSD为1.79%，大黄酸平均回收率为96.08%，RSD为2.36%。样品测定：根据上述方法，对3个不同批次的大黄样品的芦荟大黄素与大黄酸含量进行测定，见表1。

　　表1 3个批次的大黄样品的芦荟大黄素与大黄酸含量测定结果(mg.g-1)

　　样品编号 芦荟大黄素 大黄酸

　　1 0.565 0.445

　　2 0.393 0.772

　　3 2.921 4.262

　　提取方法：将芦荟大黄素与大黄酸提取率作为指标，对乙醇、甲醇两种溶剂进行考察，结果发现，甲醇的提取效果更佳;对甲醇回流以及甲醇超声两种处理方法进行了考察，结果显示，两种提取无明显差异;分别进行了30min、45min与60min甲醇超声提取，结果显示无差异。供试品溶液制备方法 在供试品溶液制备中，通过精密称取0.5g样品，并将其定容至25mL，但根据回收率试验，应当称取0.25g样品，并加入含量相等的对照品溶液最终定容至25mL，由于对照品的购买成本较高，故将其减少至0.1g，并将定容调整为10mL，两者实际上并无明显差异。综上所述，运用HPLC法同时测定芦荟大黄素与大黄酸含量，不仅具有较高准确度、精密度，且稳定性较好，各方面均与要求相符合 。

　　马青青 河南省疾病预防控制中心

　　许文清 铁道警察学院