仪器与试药 日本岛津LC-2010AHT高效液相色谱仪，盐酸巴马汀、盐酸小檗碱对照品(均由中国食品药品检定研究院提供)批号依次为：110732-201108、110713-201212;规格：供含量测定用(含量分别以86.2%、86.7%计)。乙腈为色谱纯，水为纯化水，其它试剂均为分析纯。

　　色谱条件 色谱柱：岛津 Inertsil ODS C18(4.6×250mm，5µm);流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调节至pH3.0)(30:70);流速：0.8ml/min;柱温：25℃;检测波长：348nm;理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。

　　对照品溶液的制备：取盐酸巴马汀对照品和盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加60%乙醇溶液制成每lml分别含盐酸巴马汀与盐酸小檗碱各10µg的混合溶液，即得。

　　供试品溶液的制备：取重量差异项下的本品内容物，混匀，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇(1→100)混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇(1→100)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

　　系统适用性试验 测定波长的选择：取对照品溶液，经TU-1900型紫外可见分光光度计在190.0nm～400.0nm范围内分别测定，盐酸巴马汀、盐酸小檗碱在192.80、193.00nm波长处，最大吸收，考虑到高效液相色谱仪紫外检测器在此处吸收较弱，则选择两者共有的波长吸收处，同时参照《中国药典》2010年版一部黄连项下含量测定的检测波长，故选择348nm为本实验的测定波长。

　　柱的选择及柱效的考察：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以岛津Inertsil ODS C18(4.6×250mm，5µm),流动相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(用磷酸调节至pH3.0)(30:70),流速：0.8ml/min，柱温：25℃，检测波长：348nm。

　　采用岛津Inertsil ODS C18(4.6×250mm，5µm)的柱测定，盐酸巴马汀，盐酸小檗碱对照品及供试品理论板数均较高。根据检测结果，同时参照《中国药典》2010年版一部黄连及成药含量测定项下的含量测定方法，确定本品理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。

　　阴性对照试验：为进一步考察试验的合理性，取不含黄连的阴性对照样品。依正文所述方法进行测定。结果，阴性样品色谱在与盐酸巴马汀、盐酸小檗碱对照品色谱峰相应的保留时间附近无干扰峰检出，证明本方法合理可行。

　　精密度试验：精密吸取对照品溶液10µl，注入液相色谱仪，重复6次，测定其色谱峰面积值，盐酸巴马汀RSD=0.1% 盐酸小檗碱RSD=0.2%结果表明所用仪器具良好的精密性。

　　重复性试验：取同一供试品，依正文方法独立测定6份， 盐酸巴马汀平均值0.49(mg/g)RSD=0.3% 盐酸小檗碱平均值0.49(mg/g)RSD=0.4%结果表明本法具良好的重复性。

　　稳定性试验：取供试品溶液，按正文色谱条件测定，结果盐酸巴马汀RSD=0.3% 盐酸小檗碱RSD=0.5%结果表明48小时内供试品溶液中盐酸巴马汀、盐酸小糪碱的含量基本稳定。

　　标准曲线制备 分别取盐酸巴马汀、盐酸小檗碱对照品约10mg，精密称定，分别置100ml量瓶中，用60%乙醇适量溶解并稀释至刻度，摇匀，即得贮备液。分别精密吸取盐酸巴马汀、盐酸小糪碱贮备液0.5ml、0.8ml、1ml、1.2ml、1.5ml置10ml量瓶中，再用60%乙醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述5种溶液各10µl注入高效液相色谱仪测定，以对照品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，盐酸巴马汀回归方程y=61522x-4593.6 (r=1) 盐酸小檗碱回归方程y=59518x-2859.3 (r=1)结果表明盐酸巴马汀、盐酸小檗碱分别在0.044～0.131µg范围内，呈线性关系，符合外标法定量测定的要求。

　　回收率试验 精密称取已知含量的供试品(批号：131208，盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量分别为0.4897mg、0.4890mg)九份，每三份分别精密加入盐酸巴马汀对照品溶液(87.2344µg/ml)及盐酸小檗碱对照品溶液(88.4340µg/ml)2.3ml、2.9ml、3.5ml，依法操作及测定，计算回收率，测得盐酸巴马汀的平均回收率为98.6%，RSD=1.1%;盐酸小檗碱的平均回收率为98.7%，RSD=0.7%，结果表明本法回收率较好，准确度较高。

　　样品测定结果及限度 依正文方法测定三批样品，盐酸巴马汀含量测定结果平均为0.49 mg/g，盐酸小檗碱含量测定结果平均为0.50 mg/g。

　　参照《中国药典》2010年版一部黄连药材中盐酸小檗碱的含量限度，根据三批样品的含量测定结果，暂定本品每克含盐酸小檗碱(C20H17NO4•HCl)，不得少于0.42mg;本品每克含盐酸巴马汀(C21H22ClNO4)不得少于0.40mg

　　为保证鼻炎灵丸中的黄连的质量控制，本方法使用两种专属性强的有效成份进行对照测定，即能保证黄连的专属性鉴别，也能有效的控制黄连含量。

　　孟军 戚颖欣

　　通化市食品药品检验所 吉林工程技术师范学院

　　作者简介：孟军 吉林省通化人，职称：副主任药师，本科，研究方向：食品药品检验分析。单位：通化市食品药品检验所