【食安新闻网讯】随着全球经济一体化和食品贸易国际化，食品过敏问题具有更大的潜在危险性，因此建立可靠、定量的过敏原检测方法对于确保食品标签的一致性和消费者的安全十分必要。然而因为食物过敏原在食品中的含量少以及可能被食品基质包裹等原因，食物过敏原的生物活性的检测十分困难，另一个检测问题是检测方法的灵敏度，一般来说，不同食物中检测极限要求在1—100ppm(每kg食物中含mg量级过敏性蛋白)。

　　几乎所有的过敏原(抗原)都是蛋白质或多肽类物质，多肽分子量一般在5-70KDa之间，也有一些过敏原分子量超过200KDa以上。某种食物或食物制品是否存在致敏性，通常是依据确诊敏感个体血清中键合的IgE来判断，一旦过敏原可以确认和纯化，就可以在兔子、老鼠、山羊、绵羊或鸡这些动物中获取抗体，为常规食品分析提供免疫检测方法。

　　·常见检测方法

　　RAST/EAST

　　RAST/EAST主要应用于食物过敏的临床诊断，同时也应用于食物过敏原的定性检出以及多品种食物中潜在致敏性的评价。也有少量使用RAST法进行过敏原的定量检测的文献报道，检测限为1mgkg-1。RAST或EAST的检测原理是抗原或过敏原在固定相上与特定的人类抗体IgE键合，样品中的抗原与固定相上的抗原竞争键合IgE，一种抗IgE的抗体用同位素()或酶(，如过氧化物酶)标记，加入可以改变颜色或能发光的底物用来检测键合IgE的抗体量，键合的IgE用γ-计数器或分光光度计来定量检测。此两种方法的最大缺点是无法获取过敏人群的血清以及评价方法的标准化困难。

　　RIE

　　RIE使用含有凝胶的抗体，被分析的抗原按照自身的电泳能力在凝胶中移动直到抗体和抗原结合，所形成的电泳峰高与检测抗原量成比例。RIE法检测不同食品中的几种抗原的检测极限约为2.5-30 mgkg-1。该方法的局限是实验所需的凝胶制备和免疫环节的操作程序比较复杂。

　　免疫印迹(IB)

　　点式免疫印迹测试法主要用于简单或廉价食品样品的检测，提取的样品蛋白喷洒在硝化纤维膜或PVPF膜上，用特定的与目标抗原结合的抗体进行酶标记，酶与底物反应呈现出有颜色的斑点，斑点的深浅与抗原的含量成比例。这种方法是半定量测量方法，但对某些食物(如花生)中的蛋白检出限可达到2.5 mgkg-1。

　　PCR多聚酶联反应

　　以DNA为测试对象的检测方法越来越多地应用到外来食物的检测中，如转基因谷物等。PCR方法对食物中特定过敏原的检测具有专一性和灵敏度，但是，PCR方法不能检测抗原或特定蛋白，因此检测结果不能与食物的真正过敏性相关联，而且食品加工过程对蛋白和DNA的影响不同，在一些加工工序中蛋白和DNA可能被分离，因此产品中是否有过敏原，以PCR方法的检测结果作判断可能产生错误结论。PCR方法的优点在于，以DNA为测试对象的方法与以蛋白质为测试对象的方法相比，热变性条件下目标DNA可以有效提取而不象蛋白提取时受食物基质的影响较大。

　　生物探测器

　　使用生物探测器是另一项还未普及应用到食品分析中的技术。生物探测器仪器可以即时测定特定分子之间的反应。把一个目标分子(可能是抗体(蛋白)或DNA片段)固定到传感器的表面，然后定量测定一个或两个分子间的键合反应。这种技术的特点是分析时间短、自动化程度高。生物探测器技术可以用来测定特定的蛋白质或过敏原，也可以用于测定特定的DNA片段。该技术已用于榛子、鸡蛋和牛奶中过敏原的检测。