□ 邱雄雄 詹松 岛津企业管理(中国)有限公司

　　呋喃苯烯酸钠属于硝基呋喃类药物,是人工合成的一种广谱抗菌药物,对动物和鱼类的细菌预防和治疗有良好效果。但是,世界卫生组织和联合国粮农组织联合报道硝基呋喃类药物具有潜在的致突变和致癌性。为保护消费者的健康，世界各国纷纷禁止硝基呋喃类药物在食品动物上的使用。然而，这些药物的违法使用现象仍然存在。

　　目前，国内外色谱法对呋喃苯烯酸钠残留检测主要采用HPLC-UV作为检测手段，而HPLC法由于检测灵敏度低、前处理操作繁琐费时,不能满足进出口贸易中各国对呋喃苯烯酸钠残留限量要求。为保证我国有关食品的进出口贸易，促进呋喃苯烯酸钠残留监控工作的顺利开展,建立一种快速简便、灵敏度高、准确度好的检测方法势在必行。

　　本文使用岛津LCMS-8040三重四极杆质谱，参考《SN/T 2451-2010 动物源性食品中呋喃苯烯酸钠残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》，建立了UHPLC-MS/MS法检测乳制品中呋喃苯烯酸钠残留。采用乙腈提取，正己烷萃取净化,方法简便、快速，可用于乳制品进出口样品的监控和检测。

　　实验

　　仪器

　　实验使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A与三重四极杆质谱仪LCMS-8040联用系统。具体配置为：LC-30AD×2输液泵，DGU-20A5在线脱气机，SIL-30AC自动进样器，CTO-30A柱温箱，CBM-20A系统控制器，LCMS-8040三重四极杆质谱仪，LabSolutions Ver.5.53色谱工作站。

　　分析条件

　　液相色谱条件

　　分析仪器：LC-30A系统;

　　色谱柱：Shimadzu Shim-pack XR-ODSIII 2.0mmI.D.×50mmL,1.6μm;

　　流速：0.2mL/min;

　　进样体积：5μL;

　　柱温：40℃;

　　流动相：A-0.1%甲酸水;B-乙腈;

　　洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度45%，梯度洗脱见表1。

　　质谱条件

　　分析仪器：LCMS-8040;

　　离子源：ESI，负离子扫描;

　　离子源接口电压：4.5kV;

　　雾化气：氮气3.0L/min;

　　干燥气：氮气20L/min;

　　碰撞气：氩气;

　　脱溶剂管温度：250℃;

　　加热模块温度：450℃;

　　扫描模式：多反应监测(MRM);

　　驻留时间：150ms;

　　延迟时间：3ms;

　　MRM参数见表2。

　　样品制备

　　样品前处理方法

　　参考《SN/T 2451-2010 动物源性食品中呋喃苯烯酸钠残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》前处理方法。

　　称取约5g牛奶试样，置于50mL聚丙烯具塞离心管中，加入5g无水硫酸钠混匀后，加入25mL乙腈，涡旋混匀30s，超声提取5min，于4000r/min离心5min。上清液转移至50mL容量瓶中。残渣依上述方法再提取一次，合并上清液，混匀后用乙腈定容至50mL。移取10mL提取液，于40℃氮气吹至近干，加入1.0mL0.1%甲酸溶液+乙腈(4∶1)溶液涡旋30s溶解残渣。向溶解液中加入3mL乙腈饱和正己烷，震荡后静置分层，取下层溶液于9500rpm离心5min，过滤上机测试。

　　标准溶液配制

　　用甲醇配制10mg/L的混合标准中间溶液，用乳制品空白基质溶液稀释成浓度为1、10、25、50、100µg/L标准工作液。

　　结果讨论

　　呋喃苯烯酸钠标准样品一级质谱图和产物离子扫描质谱图及呋喃苯烯酸钠标准溶液MRM色谱图见图2、图3。

　　线性关系

　　按以上分析条件进行测定，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，以1、10、25、50、100µg/L标准工作液浓度点，采用外标法建立校准曲线，如图4所示，呋喃苯烯酸钠在线性浓度范围内线性相关性良好，相关系数为0.9993。(校准曲线参数见图3)

　　检出限和定量限

　　配制7份1µg/L标准溶液，进样分析，对上述测定结果剔除离群值后将各自的7次测定结果计算其标准偏差S，此时检出限MDL=3.14×S，定量限LOQ=4×MDL。测定结果如表4所示。

　　精密度实验

　　配制低中高浓度的混合标样依次平行测定6次，呋喃苯烯酸钠的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.07%～0.107%和0.98%～1.51%之间，结果表明系统具有良好的精密度。

　　实际样品分析及回收率实验

　　将所建立的分析方法用于实际样品分析，检测牛奶样品，未检测到呋喃苯烯酸钠。图5为牛奶样品的MRM色谱图。在牛奶样品中添加浓度为1.0µg/kg的混合标准溶液，加标样品MRM色谱图如图6所示，加标回收率结果见表6。

　　结论

　　本文建立了一种使用岛津三重四极杆质谱仪LCMS-8040测定乳制品中呋喃苯烯酸钠残留量的分析方法。呋喃苯烯酸钠在1～100µg/L线性范围内线性良好，相关系数达到0.9999。对低中高不同浓度的混合标准溶液进行精密度实验，连续6次进样保留时间和峰面积的相对标准偏差在0.07%～0.107%和0.98%～1.51%之间，仪器精密度良好。考察牛奶样品分析及加标实验，呋喃苯烯酸钠的回收率范围为86.4%，可以满足乳制品中呋喃苯烯酸钠残留量的检测需求。